24孔板里293細(xì)胞轉(zhuǎn)染后面的孔里細(xì)胞死亡原因

問：我在24孔板里做293細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染試劑是invitrogen的Lipofectamine2000。奇怪的是，每次加完DNA- Lipofectamine complex，24個孔當(dāng)中的后面幾個孔(比如*后6個孔)里的細(xì)胞就明顯有一部分死亡，死亡率是10-30%，通常*嚴(yán)重的是*后兩個孔。但是前面的孔里的細(xì)胞總是沒有問題。用不同的DNA做實驗，都發(fā)生同樣的問題，就是總是后面的孔里細(xì)胞死亡，而前面的孔里細(xì)胞沒問題。是怎么回事呢?

答：如果你在加DNA-Lipofectamine complex時孔板里是沒有液體的，會在風(fēng)機(jī)下風(fēng)干的，很快的，這樣你在加到后面的孔時，部分細(xì)胞已經(jīng)干了，所以你先加的很好，后面的就有問題。解決辦 法就是，你不要一起吸凈所有孔的液體，6個孔為一個單位，吸棄孔里的液體，在加DNA-Lipofectamine complex，就可以了。